各類反相填料的應(yīng)用范圍和特點說明
1.C18反相填料
C18填料是以高純球型硅膠為基質(zhì)的反相C18萃取柱。與普通未封端C18材料比較,球型材料均勻度更高,流速更穩(wěn)定;表面較多的硅醇官能團(tuán)提供了額外的極性相互作用。同時與封端的吸附劑相比,增強(qiáng)了對堿性化合物的保留。是極性和非極性化合物萃取的通用型固定相。
2.C8反相填料
C8填料是末端*封尾的辛基鍵合相,為中等疏水性的反相硅膠基質(zhì)填料,通過疏水相互作用保留非極性化合物。與C18填料相比,C8填料的碳鏈較短,非極性疏水相互作用較弱。若使用C18造成非極性目標(biāo)物難以洗脫,可用C8替代。
3.氨基反相填料
NH2(氨基)是以硅膠為基質(zhì)的氨丙基萃取柱。它具有極性固定相和弱陰離子交換劑,可通過弱陰離子交換(水溶液)或極性吸附(非極性有機(jī)溶液)達(dá)到保留作用,因此具有雙重作用。當(dāng)用在非極性溶液中(如正己烷)進(jìn)行預(yù)處理時,它能與帶有—OH,—NH或—SH官能團(tuán)的分子形成氫鍵。氨基pKa=9.8;與陰離子的作用較SAX弱,在pH<7.8水溶液中,可用做弱陰離子交換劑,可用于去除樣品中的磺酸根離等強(qiáng)陰離子。
反相填料應(yīng)用范圍:
-C18:廣泛用于藥物、天然產(chǎn)物、多肽、食品添加劑、氨基酸等樣品的分離和分析。
-C8:萃取血漿中的脂溶性和水溶性維生素、檢測肉類中的激素殘留、檢測廢棄物中的農(nóng)藥殘留、對生物大分子進(jìn)行脫鹽。
-NH2:分離各種單糖、不宜分析含醛基、羰基的化合物、還原糖,可用于分離非還原(如D-半乳糖,D-乙酰葡萄糖,D-核糖,寡糖等)。
反相填料特點:
1.多孔球形硅膠填料,表面光滑,空隙分布均勻,具有良好的機(jī)械穩(wěn)定性,可以在DAC柱上反復(fù)填裝,
2.其金屬含量低,與固定相表面產(chǎn)生的配位鍵少,固化學(xué)穩(wěn)定性高。
3.高度粒徑均一,無碎片無小顆粒,可以避免篩板堵塞等問題
4.鍵合相品種眾多,有C18,C8,C4,C1,NH2,SIL等
5.良好化學(xué)和PH穩(wěn)定性:洗脫集中,便于在線清洗,使用壽命長
6.不同粒徑的批次穩(wěn)定,重現(xiàn)性好,容易放大生產(chǎn)。在醫(yī)學(xué).制藥.農(nóng)業(yè)化學(xué).食品.生物分子.染料等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。