反相填料常是以硅膠為基礎(chǔ),性能如下
更新時(shí)間:2021-09-24瀏覽:669次
反相填料常是以硅膠為基礎(chǔ),表面鍵合有極性相對(duì)較弱的官能團(tuán)的鍵合相。 反相色譜所使用的流動(dòng)相極性較強(qiáng),通常為水,緩沖液與甲醇,已腈等混合物。 樣品流出色譜柱的順序是極性較強(qiáng)組合先被沖出,而極性弱的組份會(huì)在色譜柱上有 更強(qiáng)的保留。 常用的反相填料有YMC C18填料(ODS),C8(MOS),C4(B),C6H5(Phenyl)等。
聚合物調(diào)料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等,其主要優(yōu)點(diǎn)是在PH值為1~ 14均可使用。 相對(duì)與硅膠基質(zhì)的YMC C18填料,這類(lèi)填料具有更強(qiáng)的疏水性;大孔的聚合物填料對(duì)蛋白 質(zhì)等樣品的分離非常有效。 現(xiàn)在的聚合物填料的缺點(diǎn)是相對(duì)硅膠基質(zhì)填料,色譜柱柱效較低。
反相填料在干燥狀態(tài)下為透明無(wú)孔凝膠,但是通過(guò)有機(jī)溶劑溶脹后可以變成具有分子篩性能的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),凝膠填料*溶脹后,孔徑和排阻極限由交聯(lián)度和洗脫劑決定??梢栽诒健⒓妆?、二甲苯、二氯甲烷、四氯化碳、二甲基甲酰胺酮及混合有機(jī)溶劑中溶脹分離??捎糜谟H脂性多聚物和有機(jī)洗脫溶質(zhì)的分子量、結(jié)構(gòu)類(lèi)似物體積排阻層析,也可以分析分子體積不同、具有相同化學(xué)性質(zhì)的高分子同系物。
反相填料性能:
1、高機(jī)械強(qiáng)度聚合物基質(zhì)實(shí)現(xiàn)高通量純化
2、高流速下維持高吸附容量及高分離度
3、適用于中期純化(intermediate step)和終產(chǎn)品(polishing step)純化
4、強(qiáng)陰離子型(Q)和強(qiáng)陽(yáng)離子型(S)供選擇
5、粒徑30m(用于工業(yè)化生產(chǎn))和10?m(用于高分離度純化)供選擇